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導致液相色譜柱失效問題怎樣防止氣體進入

發(fā)布時間:2022-05-24

  導致液相色譜柱失效的常見問題及解決辦法。

  1篩板堵塞。

  色譜柱入口篩板堵塞是最常見的問題之一,會導致柱壓升高,色譜峰拖尾,塔板數(shù)降低等問題,通常分析樣品中微粒雜質(zhì)最右可能堵塞色譜柱入口,因此分析時,需要先過濾或者離心,乳濁或渾濁樣品應以0.25μm濾膜處理,也可用針頭過濾器過濾,進樣器與泵密封墊的磨損也會帶入微粒,色譜柱在進樣閥與色譜柱之間使用0.25μm或0.45μm的在線過濾器,通??梢员苊膺@類問題。

  2強保留樣品組分。

  強吸附性的樣品組分吸附在柱頭填料上,能嚴重地影響色譜柱壽命,像生物組織或體液的提取物,天然產(chǎn)物等復雜樣品,極易造成柱頭的污染,相對較純的樣品,一般不會出現(xiàn)這一問題,色譜柱應用中,色譜峰嚴重拖尾或分裂往往是強保留污染物在柱頭吸附的體現(xiàn)。

  3色譜柱裝填不良。

  裝填不良的色譜柱,在色譜柱短時間應用后,填充床的壓縮通常使柱頭處產(chǎn)生塌陷,導致柱效突然降低,色譜柱的初始評價指標,如塔板數(shù),不對稱因子等往往不能很好地表征色譜柱床層的穩(wěn)定性,這種情緒只能在實際應用中發(fā)現(xiàn)。

  有些色譜柱(如凝膠柱)不允許氣泡進入,否則會降低柱效,甚至形成難以去除的小氣室,因此,為了防止氣泡進入柱,必須使用脫氣流動相,并嚴格按照以下程序安裝柱:。

  A.取下下色譜色譜柱柱入口的密封螺釘觀察是否有溶劑泄漏。

  b.如果溶劑滲出則可以將色譜柱連接到管道上避免氣泡進入。

  C.如果沒有溶劑滲出,說明空氣已經(jīng)進入色譜柱的這一端,此時,將色譜柱出口端與進樣閥連接,用流動相反方向沖洗色譜柱,以除去色譜柱中的空氣,優(yōu)選用0.2ml/min的小流量沖洗柱,這將導致柱性能的降低,如果溶劑的流速過快或壓力的突然增加將導致柱性能的降低。

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