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ODS色譜柱的選擇指南:如何選擇符合需求的ODS色譜柱?

欄目:行業(yè)資訊 發(fā)布時(shí)間:2023-06-14
ODS色譜柱是一種應(yīng)用廣泛的反相色譜柱,其主要特點(diǎn)是基質(zhì)為十八烷基硅烷(C18),是分析和定量有機(jī)化合物的之一,在物質(zhì)分析領(lǐng)域,選擇合適的ODS色譜柱非常重要,因此需要一份精準(zhǔn)的ODS色譜柱選擇指南,以滿足研究者的具體需求。


  ODS色譜柱是一種應(yīng)用廣泛的反相色譜柱,其主要特點(diǎn)是基質(zhì)為十八烷基硅烷(C18),是分析和定量有機(jī)化合物的之一,在物質(zhì)分析領(lǐng)域,選擇合適的ODS色譜柱非常重要,因此需要一份精準(zhǔn)的ODS色譜柱選擇指南,以滿足研究者的具體需求。

  1,ODS色譜柱的選擇準(zhǔn)則。

  ODS色譜柱的選擇準(zhǔn)則包括分析的化學(xué)性質(zhì),分子量,極性,溶劑性質(zhì)和實(shí)驗(yàn)條件等。

  (1)樣品的化學(xué)性質(zhì):需要根據(jù)樣品的化學(xué)性質(zhì)和用途選擇ODS色譜柱,如酸性,堿性和中性化合物需要不同的ODS色譜柱,對(duì)于酸性化合物,例如羧酸,磷酸和磺酸等,需要使用硅膠C18色譜柱,而對(duì)于堿性化合物,如氨基酸,蛋白質(zhì)和多肽物質(zhì),需要使用羧甲基色譜柱,中性化合物可以使用普通的ODS色譜柱。

 ?。?)分子量:分子量較大的化合物需要較長(zhǎng)的ODS色譜柱,以保證足夠分離,而較小分子量的化合物則可以選擇較短的ODS色譜柱。

 ?。?)極性:對(duì)于極性較強(qiáng)的化合物,如對(duì)數(shù)$\itP$值小于2的物質(zhì),則需要使用極性較強(qiáng)的ODS色譜柱,如未取代的硅膠ODS色譜柱,而對(duì)于極性較小的化合物,如對(duì)數(shù)$\itP$值大于4的化合物,則可以使用常規(guī)的ODS色譜柱。

  (4)溶劑性質(zhì):在使用ODS色譜柱前,需要考慮所使用的溶劑種類和濃度,酸性和堿性溶液會(huì)影響ODS色譜柱,因此需要選擇相應(yīng)的保護(hù)柱或換柱進(jìn)行預(yù)處理和后處理。

  (5)實(shí)驗(yàn)條件:需要考慮實(shí)驗(yàn)條件,如溫度,流速,檢測(cè)器和移相等因素,進(jìn)一步優(yōu)化ODS色譜柱的選擇。

  2,ODS色譜柱的分類和特性。

  常用的ODS色譜柱有C18,C8,C4和C2等類型,不同類型的ODS色譜柱各有特點(diǎn),需要根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)需求選擇。

  (1)C18色譜柱:是ODS色譜柱中較常用的,適用于常見(jiàn)的低極性物質(zhì),例如藥物化學(xué),天然產(chǎn)物和化學(xué)合成等領(lǐng)域的分離與純化,其中,針對(duì)RNA/DNA/核苷酸的分析,可以使用特制的ODS-C18有機(jī)硅凝膠離子交換色譜柱Alpha-BondC18(hybrid-silicabondedphasewithanion-exchangegroup),具有更厚的硅凝膠層,更好的底物離解和選擇性,同時(shí)避免了因DNA缺失而導(dǎo)致的負(fù)離子排斥問(wèn)題。

 ?。?)C8色譜柱:C8色譜柱具有較強(qiáng)的親水性,適用于相對(duì)較極性的有機(jī)化合物的色譜分離,如農(nóng)藥中間體,有機(jī)溶劑和芳香族化合物等。

 ?。?)C4和C2色譜柱:C4和C2色譜柱具有更強(qiáng)的親水性,適用于極性化合物的分離,并且可以減少色譜中非SPECIFICBINDING的現(xiàn)象,如果需要尋求特定極性范圍內(nèi)的選擇性,則可以優(yōu)先考慮這兩款色譜柱。

  3,ODS色譜柱的品質(zhì)和性能。

  選擇ODS色譜柱時(shí),需要考慮其品質(zhì)和性能,以獲得高精度的分析結(jié)果。

  (1)粒徑大?。毫皆叫?,分離效果越好,但更易堵塞和損壞常規(guī)的色譜柱相,同時(shí)和流速成反比例關(guān)系,選擇時(shí)需結(jié)合固定相細(xì)度,性能和價(jià)格等因素進(jìn)行考量。

 ?。?)碳負(fù)載量:影響分離效果和硅凝膠層厚度但價(jià)格越高,性能約穩(wěn)定。

 ?。?)硅凝膠層修飾技術(shù):影響固定相與硅膠膠粒的結(jié)合強(qiáng)度,分離效能和荷電狀態(tài),常用的包括縮合法,偶聯(lián)法和親化修飾法等,親和修飾法如茂金屬化合物的配位氧化成分子的C=C配對(duì)而形成氧化親和性多面體鍵,可以顯著提升柱子的特異性與分離度。

 ?。?)批次一致性:由于生產(chǎn)批次和硅烷化方法的差異,柱子的穩(wěn)定性,Retentiontime,準(zhǔn)確性和重復(fù)性會(huì)存在差異,因此,在購(gòu)買ODS色譜柱時(shí),應(yīng)選擇有一定歷史的品牌,有良好的售后服務(wù)的經(jīng)銷商或生產(chǎn)廠家,確保穩(wěn)定性和后續(xù)的售后服務(wù)。

  總而言之,ODS色譜柱選擇不僅需要根據(jù)樣品類型和物性進(jìn)行科學(xué)合理的選擇,同時(shí)需要仔細(xì)考慮顆粒粒徑,碳負(fù)載,硅凝膠層修飾技術(shù),批次一致性和品牌信譽(yù)等相關(guān)因素,以保證較好的分離效果和分析結(jié)果。



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