液相色譜柱的存儲液，如果沒有特別說明，都是根據(jù)評價報告所指出的流動相。在使用之前，請務(wù)必確保液相色譜柱的存儲液與待分析樣品的流動相是否相容。對于反相色譜，如果使用高濃度的鹽或緩沖液作為洗脫劑，應(yīng)首先用約10%左右低濃度的有機(jī)相進(jìn)行洗脫，以過渡一下，否則緩沖液中的鹽會在高濃度的有機(jī)相中析出，從而導(dǎo)致色譜柱堵塞。

液相色譜柱升高壓力的原因有以下幾種：

1、前置處理的移動階段

進(jìn)口濾片會堵塞色譜柱中的雜質(zhì)，從而使壓力升高。這通常是由于流動相沒有經(jīng)過濾或雖然經(jīng)過濾但過濾效果不佳，導(dǎo)致固體雜質(zhì)停留在濾片上引發(fā)的。

2、樣品的沉淀

當(dāng)樣品的溶解液與流動相不相容時，進(jìn)樣進(jìn)入色譜柱后，有時會由于溶解度下降而發(fā)生沉淀，導(dǎo)致壓力升高。

3、晶體的析出

在使用含有緩沖液的移動相時，緩沖液中的無機(jī)鹽有可能會保留在體系中，當(dāng)它們在新的移動相中的溶解度降低時會析出，導(dǎo)致流體阻力增加和壓力上升。

4、微生物滋生

霉菌會在流動系統(tǒng)、管道或柱子的進(jìn)口處繁殖生長，堵塞過濾板，增加壓力。因此，使用磷酸鹽緩沖液時通常需要現(xiàn)配現(xiàn)用。

5、溶質(zhì)吸附

當(dāng)溶質(zhì)在柱子表面有很強(qiáng)的吸附能力，并且使用的流動相難以將其清洗干凈時，未被清洗的溶質(zhì)會不斷積累，導(dǎo)致阻力增加和壓力升高。

6、流動相更換速度較快

當(dāng)改變流動相體系時，即使不進(jìn)行更換操作，不同性質(zhì)且無法相互混合的流動相出現(xiàn)在同一體系中，都可能導(dǎo)致壓力增加。

7、壓力脈沖

系統(tǒng)運(yùn)行時，可能會出現(xiàn)突然的內(nèi)部壓力變化。這種壓力脈沖會導(dǎo)致多孔填料破裂和柱床結(jié)構(gòu)微小變形，同時填料微屑長期積累也可能導(dǎo)致柱床阻力上升，從而增加壓力。