液相色譜柱的儲(chǔ)存液若無(wú)特別說(shuō)明，均為評(píng)價(jià)報(bào)告中所列的流動(dòng)相。在使用之前，務(wù)必確認(rèn)儲(chǔ)存液與待分析樣品的流動(dòng)相是否能夠互溶。在反相色譜的操作中，如果使用高濃度的鹽或緩沖液作為洗脫劑，建議先用約10%的低濃度有機(jī)相洗脫劑進(jìn)行過(guò)渡，否則緩沖液中的鹽分在高濃度有機(jī)相中可能會(huì)析出，導(dǎo)致色譜柱堵塞。

液相色譜柱的柱壓升高可能由以下幾種原因引起。

1、流動(dòng)相的預(yù)處理

雜質(zhì)堵塞了色譜柱的進(jìn)水濾片，導(dǎo)致壓力增加。這通常是因?yàn)榱鲃?dòng)相沒(méi)有經(jīng)過(guò)過(guò)濾，或者雖然經(jīng)過(guò)過(guò)濾，但過(guò)濾效果不佳，從而使固體雜質(zhì)滯留在濾板上。

2、樣品的沉淀

當(dāng)溶解樣品的溶劑與流動(dòng)相不一致時(shí)，樣品進(jìn)入色譜柱時(shí)，可能因?yàn)槿芙舛认陆刀l(fā)生沉淀，導(dǎo)致壓力升高。

3、晶體的析出

在使用含有緩沖液的流動(dòng)相時(shí)，緩沖液中的無(wú)機(jī)鹽可能會(huì)在系統(tǒng)內(nèi)殘留。這些無(wú)機(jī)鹽在新流動(dòng)相中的溶解度降低，可能會(huì)析出，從而導(dǎo)致流體阻力增加和壓力升高。

4、細(xì)菌或霉菌滋生

霉菌會(huì)在流動(dòng)相、管道或柱子入口處滋生，導(dǎo)致濾板被堵塞，從而使壓力升高。因此，使用磷酸鹽緩沖液時(shí)通常需要現(xiàn)配現(xiàn)用。

5、溶質(zhì)吸附

當(dāng)溶質(zhì)在柱子上被強(qiáng)烈吸附，并且所使用的流動(dòng)相難以將其洗脫時(shí)，累積的未洗脫溶質(zhì)會(huì)導(dǎo)致阻力增加和壓力升高。

6、流動(dòng)相更換的頻率過(guò)高。

當(dāng)流動(dòng)相體系發(fā)生變化時(shí)，不同性質(zhì)、互不混溶的流動(dòng)相可能會(huì)出現(xiàn)在同一體系中，這也可能導(dǎo)致壓力升高。

7、壓力脈沖

在運(yùn)行過(guò)程中，系統(tǒng)內(nèi)的壓力有時(shí)會(huì)出現(xiàn)突然的波動(dòng)。這種壓力脈沖可能會(huì)導(dǎo)致多孔填料的破損以及柱床結(jié)構(gòu)的細(xì)微變化。同時(shí)，填料微屑的長(zhǎng)期積累也可能增加柱床的阻力，從而引起壓力的升高。