手性分析很關(guān)鍵的一項(xiàng)是流動(dòng)相的選擇，手性分析一般都采用正相，使用zui多的流動(dòng)相是正己烷、正庚烷、乙醇和異丙醇這四種，其中起洗脫作用的流動(dòng)相是乙醇和異丙醇，正己烷和正庚烷用來(lái)調(diào)節(jié)流動(dòng)相的洗脫強(qiáng)度。

　　做手性分析時(shí)一般選用兩只柱子：AD-H和IC，基本上這兩只柱子可以解決遇到的所有的手性化合物，AD-H是早期我們一直在使用的，后來(lái)的IC可以使用更多的溶劑從而提供了更多的選擇性，但是習(xí)慣先用AD-H做手性分析方法開(kāi)發(fā)，手性分析基本上都用恒流來(lái)做，溶劑一般也都是提前混合好再放到儀器上用，主要是因?yàn)檎嗳軇┰趦x器上混合效果不好。

　　如前邊所述，一般情況下拿到一個(gè)樣品，首先選擇的是用正己烷和乙醇做流動(dòng)相，根據(jù)化合物分子結(jié)構(gòu)式來(lái)判斷其極性的大小，進(jìn)而來(lái)選擇流動(dòng)相的比例，極性大的選擇使用的乙醇比例大一點(diǎn)，極性小的選擇使用的乙醇比例小一點(diǎn)，乙醇比例一般是從大到小，根據(jù)分離情況以5%或10%的比例遞減，一般要求*針至少能把樣品在相對(duì)較短的時(shí)間內(nèi)從柱子上洗脫下來(lái)，然后再去做調(diào)整，如果開(kāi)始的時(shí)候醇的比例選的過(guò)小，樣品可能在柱子上一兩個(gè)小時(shí)都洗不下來(lái)。消旋體出峰以后如果是一個(gè)峰，可以將峰放大，觀察有沒(méi)有分叉的跡象，有的話，可以通過(guò)適當(dāng)?shù)慕档痛碱?lèi)的比例來(lái)進(jìn)一步提高分離度，如果分得太開(kāi)，可以適當(dāng)?shù)奶岣叽碱?lèi)的比例來(lái)縮短分析時(shí)間，通過(guò)對(duì)流動(dòng)相比例的調(diào)整，使分析時(shí)間和分離度都能滿足手性分析的要求。

　　如果樣品在使用一種醇類(lèi)時(shí)沒(méi)有選擇性，即無(wú)論怎樣減小醇的比例樣品都沒(méi)有分離的跡象，可以換一種醇來(lái)試，通常乙醇和異丙醇會(huì)有不同的選擇性，很多樣品乙醇分不開(kāi)，異丙醇能分離的很好。異丙醇也不行的時(shí)候可以嘗試在乙醇或者異丙醇里加入合適濃度的叔丁醇或者是甲醇，對(duì)于IC色譜柱可以嘗試其它如二氯甲烷、乙酸乙酯和甲苯等其它溶劑，每一種溶劑都能為手性分析提供獨(dú)特的選擇性，一般除了乙醇、異丙醇之外我使用zui多的還是叔丁醇，其次是甲醇，叔丁醇可以單獨(dú)和正己烷做流動(dòng)相，甲醇必須結(jié)合乙醇或異丙醇混合使用。需要著重強(qiáng)調(diào)的是，更換醇的種類(lèi)，有可能會(huì)導(dǎo)致對(duì)映異構(gòu)體出峰順序的改變，使用乙醇的流動(dòng)相，如果R構(gòu)型先出峰，更換為異丙醇以后，有可能(不是一定)R構(gòu)型會(huì)后出峰，S構(gòu)型跑到前邊去了。

　　雖然提高柱溫能夠使峰形變窄變細(xì)，但是會(huì)降低分離度，而且大賽璐的手性柱溫度上限就是40度(這一點(diǎn)在超臨界流體色譜應(yīng)用上受限尤為明顯)，所以優(yōu)化分析方法時(shí)很少有人在柱溫上下功夫。另外手性柱分析樣品的保留時(shí)間受室溫變化的影響特別大，通常大家都習(xí)慣用消旋體圖譜計(jì)算對(duì)映異構(gòu)體相對(duì)保留時(shí)間的方法根據(jù)主峰的保留時(shí)間來(lái)計(jì)算異構(gòu)體的出峰位置。